15L气升式外环流发酵罐操作规程

1、开启空气压缩机和冷冻干燥机，给系统供风。

2、定时开启空气预过滤器（空气冷冻干燥机前）和空气贮罐的排水阀排水。

3、将空气压力减至0.3Mpa（表），再进入空气总过滤器（5英寸过滤器，不进行热蒸汽消毒），避免超压引起事故。

4、开启蒸汽总阀，使蒸汽压力表指示在0.3MPa(表)，开启蒸汽过滤器前的阀，供干净蒸汽给空气过滤器进行蒸汽消毒，关闭JPF空气过滤器（小过滤器）进空气阀、打开进蒸汽阀，打开排污阀，开始给JPF消毒。

5、调整各进出汽阀的开度，使JPF过滤器表压保持在0.12Mpa～0.15MPa，维持20分钟，将蒸汽切换成空气，即快速关闭进蒸汽阀、开启进空气阀，将空气过滤器吹干。

6、调节进空气阀和排污阀，使过滤器表压在0.2～0.25Mpa，吹气15分钟，关排污阀，关闭出空气阀，保持JPF过滤器压力表指示在0.2～0.25Mpa。过滤器无菌空气进入备用状态。

1、排放干净发酵罐中液体。

2、开启夹套排水阀（3），排放干净夹套中水，并保证冷凝水排放畅通。

3、开启蒸汽总阀（5）、蒸汽进夹套阀（10）向夹套通蒸汽，给发酵罐间接加热。

4、开启放料管路蒸汽阀（1）和发酵罐放料阀（19），关闭转子流量计与空气过滤器之间的阀门（2）。开启空气进管上的蒸汽阀（8，9）（蒸汽过滤器前后的阀）；两路蒸汽向发酵罐直接蒸汽加热。

5、始终打开排汽阀（12）排汽，当有大量蒸汽逸出时，适当关小排汽阀（12，1）。

6、调节各进汽阀（5，9，10）和排汽阀（12，1）开关度，使发酵罐温度维持在121℃，罐压维持在0.1Mpa，保温20分钟。

7、保温时间一到，关闭各进蒸汽阀（5，9，10），但绝对不允许同时关闭排汽阀（12，1），以免造成由于发酵罐内或夹套内气体冷缩形成真空，吸瘪容器。此时宜将排汽阀开大，保证容器内外压力平衡。

8、发酵罐可以自然冷却，也可以开启夹套进水阀（14，15，16）和夹套排水阀（4），通过由夹套进行发酵罐冷却。

9、开启进空气阀，给发酵罐进适量的无菌空气，给发酵罐保压0.05Mpa，以等待进料。

10、空罐消毒将pH、DO电极取出，放入缓冲液中。

1、插入pH、DO电极，保证拧紧无泄漏，关闭发酵罐放料阀（19）、开启进料口（11）（本反应器与接种口合用），通过漏斗将加热至一定温度的料液加入发酵罐中。

2、开启夹套排水阀（3），排净夹套中水，并保证冷凝水排放畅通。

3、开启蒸汽总阀（5）与夹套进汽阀（6）向夹套加蒸汽，给发酵液间接加热至90～100℃,关闭转子流量计与空气过滤器之间的阀门（2）。

4、开启发酵罐排料阀旁的蒸汽阀（10），关闭底阀（1），打开排料阀（19），给发酵液进行直接蒸汽加热，同时开启空气进管上的蒸汽阀（7，8，9）（包括蒸汽过滤器前后的阀）；两路蒸汽向发酵罐直接蒸汽加热。

5、调节各进汽阀（5，9，10）和排汽阀开度（12），使发酵液温度维持在121℃，罐压维持在0.1Mpa，保温时间15分钟。

6、保温时间一到，立即关闭各进蒸汽阀（5，9，10），同时开启进空气阀（18，2），将无菌空气切换进发酵罐，此时通风量应较小，控制好罐压，以免泡沫冒罐逃液。自此之后，要保证发酵罐始终处于正压状态（P_表≥0.05Mpa）。

7、以最快速度关闭夹套进蒸汽阀（6）和夹套排冷凝水阀（3），开启冷却水进夹套阀（16）给夹套进水，开启电磁阀的旁通阀(4)排冷却水，将发酵液温度迅速冷却至40℃，灭菌与降温过程，发酵罐与恒温水控温智能表始终开启，监测整个过程温度变化。

8、等发酵罐温降至35℃左右，关闭排冷却水旁路阀(4)，将发酵罐切换到自动控温状态（参考发酵过程控制系统《用户手册》）。

9、调节进空气与排气阀使空气流量计指示在工艺要求值，使发酵罐压维持在0.08～0.1Mpa，等待接种。

10、接种前对DO电极量程进行校正。pH电极、DO电极在插入前进行校准。

1、蒸汽消毒时，由于反应器升液管与降液管冷热不匀，可能造成震动和响声，属正常现象，若震荡太大，可以考虑用空气辅助带动循环。

2、空罐消毒时，一定不能将发酵罐进出汽口的阀全部关死，或出汽阀关得太小，以免形成真空造成发酵罐真空破坏。

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