1、开启空气压缩机和冷冻干燥机,给系统供风。
2、定时开启空气预过滤器(空气冷冻干燥机前)和空气贮罐的排水阀排水。
3、将空气压力减至0.3Mpa(表),再进入空气总过滤器(5英寸过滤器,不进行热蒸汽消毒),避免超压引起事故。
4、开启蒸汽总阀,使蒸汽压力表指示在0.3MPa(表),开启蒸汽过滤器前的阀,供干净蒸汽给空气过滤器进行蒸汽消毒,关闭JPF空气过滤器(小过滤器)进空气阀、打开进蒸汽阀,打开排污阀,开始给JPF消毒。
5、调整各进出汽阀的开度,使JPF过滤器表压保持在0.12Mpa~0.15MPa,维持20分钟,将蒸汽切换成空气,即快速关闭进蒸汽阀、开启进空气阀,将空气过滤器吹干。
6、调节进空气阀和排污阀,使过滤器表压在0.2~0.25Mpa,吹气15分钟,关排污阀,关闭出空气阀,保持JPF过滤器压力表指示在0.2~0.25Mpa。过滤器无菌空气进入备用状态。
1、排放干净发酵罐中液体。
2、开启夹套排水阀(3),排放干净夹套中水,并保证冷凝水排放畅通。
3、开启蒸汽总阀(5)、蒸汽进夹套阀(10)向夹套通蒸汽,给发酵罐间接加热。
4、开启放料管路蒸汽阀(1)和发酵罐放料阀(19),关闭转子流量计与空气过滤器之间的阀门(2)。开启空气进管上的蒸汽阀(8,9)(蒸汽过滤器前后的阀);两路蒸汽向发酵罐直接蒸汽加热。
5、始终打开排汽阀(12)排汽,当有大量蒸汽逸出时,适当关小排汽阀(12,1)。
6、调节各进汽阀(5,9,10)和排汽阀(12,1)开关度,使发酵罐温度维持在121℃,罐压维持在0.1Mpa,保温20分钟。
7、保温时间一到,关闭各进蒸汽阀(5,9,10),但绝对不允许同时关闭排汽阀(12,1),以免造成由于发酵罐内或夹套内气体冷缩形成真空,吸瘪容器。此时宜将排汽阀开大,保证容器内外压力平衡。
8、发酵罐可以自然冷却,也可以开启夹套进水阀(14,15,16)和夹套排水阀(4),通过由夹套进行发酵罐冷却。
9、开启进空气阀,给发酵罐进适量的无菌空气,给发酵罐保压0.05Mpa,以等待进料。
10、空罐消毒将pH、DO电极取出,放入缓冲液中。
1、插入pH、DO电极,保证拧紧无泄漏,关闭发酵罐放料阀(19)、开启进料口(11)(本反应器与接种口合用),通过漏斗将加热至一定温度的料液加入发酵罐中。
2、开启夹套排水阀(3),排净夹套中水,并保证冷凝水排放畅通。
3、开启蒸汽总阀(5)与夹套进汽阀(6)向夹套加蒸汽,给发酵液间接加热至90~100℃,关闭转子流量计与空气过滤器之间的阀门(2)。
4、开启发酵罐排料阀旁的蒸汽阀(10),关闭底阀(1),打开排料阀(19),给发酵液进行直接蒸汽加热,同时开启空气进管上的蒸汽阀(7,8,9)(包括蒸汽过滤器前后的阀);两路蒸汽向发酵罐直接蒸汽加热。
5、调节各进汽阀(5,9,10)和排汽阀开度(12),使发酵液温度维持在121℃,罐压维持在0.1Mpa,保温时间15分钟。
6、保温时间一到,立即关闭各进蒸汽阀(5,9,10),同时开启进空气阀(18,2),将无菌空气切换进发酵罐,此时通风量应较小,控制好罐压,以免泡沫冒罐逃液。自此之后,要保证发酵罐始终处于正压状态(P表≥0.05Mpa)。
7、以最快速度关闭夹套进蒸汽阀(6)和夹套排冷凝水阀(3),开启冷却水进夹套阀(16)给夹套进水,开启电磁阀的旁通阀(4)排冷却水,将发酵液温度迅速冷却至40℃,灭菌与降温过程,发酵罐与恒温水控温智能表始终开启,监测整个过程温度变化。
8、等发酵罐温降至35℃左右,关闭排冷却水旁路阀(4),将发酵罐切换到自动控温状态(参考发酵过程控制系统《用户手册》)。
9、调节进空气与排气阀使空气流量计指示在工艺要求值,使发酵罐压维持在0.08~0.1Mpa,等待接种。
10、接种前对DO电极量程进行校正。pH电极、DO电极在插入前进行校准。
1、蒸汽消毒时,由于反应器升液管与降液管冷热不匀,可能造成震动和响声,属正常现象,若震荡太大,可以考虑用空气辅助带动循环。
2、空罐消毒时,一定不能将发酵罐进出汽口的阀全部关死,或出汽阀关得太小,以免形成真空造成发酵罐真空破坏。